A HPLC analízis alkalmazása rotációs bepárlóban

A nagy teljesítményű folyadékkromatográfiát (HPLC) nagynyomású folyadékkromatográfiának, nagy sebességű folyadékkromatográfiának, nagyfelbontású folyadékkromatográfiának és modern oszlopkromatográfiának is nevezik. Az 1970-es években gyorsan kifejlesztett hatékony és gyors analitikai elválasztási technológia, amely a modern elválasztási tesztelés fontos eszköze.

A nagy teljesítményű folyadékkromatográfia (HPLC) folyadékot használ mozgófázisként, és nagynyomású infúziós rendszert alkalmaz a mozgófázis, például különböző polaritású egyetlen oldószer vagy különböző arányú oldószer- és pufferoldat keverék szivattyúzása az állófázisú kromatográfiás oszlopba. Az oszlopban lévő komponensek szétválasztása után a detektorba kerülnek kimutatásra, hogy megvalósítsák a minta elemzését.

A nagy teljesítményű folyadékkromatográfia elválasztási mechanizmusa ugyanaz, mint a hagyományos oszlopkromatográfiáé, de a töltet finomabb, és nagynyomású szivattyúval kell tolni, amely nagy oszlophatékonysággal és gyors elemzési sebességgel rendelkezik. A gázkromatográfiától eltérően a folyadékkromatográfiában a mozgófázis is részt vesz a komponensek elválasztási folyamatában, összetétele, aránya és pH-értéke rugalmasan állítható, többféle elválasztási móddal. A gyakorlatban a minták retenciós értékét és szelektivitását a kromatográfiás oszlopban a mozgófázis összetételének változtatásával állítják be, így a különböző minták szétválaszthatók.

 

A HPLC elemzés összetevői

 

Oszlop: Az oszlop a HPLC rendszer központi eleme, amelyet a mintában lévő vegyületek elkülönítésére használnak. A gyakori elválasztó oszlopok közé tartozik a fordított fázisú oszlop, ioncserélő oszlop, gélszűrős oszlop stb., és ezek kiválasztása az elválasztandó vegyület tulajdonságaitól és az elemzés céljától függ.

Mobil fázis: A mozgófázis olyan oldószerek kombinációja, amelyeket a HPLC-ben használnak a minta elválasztó oszlopon való áthaladására. A mozgófázis általában oldószerek keverékéből áll, amely lehet egyetlen oldószer vagy több oldószer keveréke is bizonyos arányban. A megfelelő áramlás kiválasztása nagyon fontos az elválasztási hatás szempontjából.

Szivattyú: A szivattyú a mozgófázis biztosítására szolgál, és bizonyos nyomáson átnyomja az elválasztó oszlopon. A gyakori szivattyúk közé tartozik az állandó nyomású szivattyú és a gradiens szivattyú. A gradiens szivattyú megvalósíthatja a mozgófázis összetételének lineáris vagy nemlineáris megváltoztatását, hogy jobb elválasztási hatást érjen el.

Injektor: Az injektort a vizsgálandó minta HPLC rendszerbe történő bevezetésére használják. A mintavevő lehet kézi működtetésű fecskendő vagy automatikus mintavevő. Általában a pontos térfogat és jó ismételhetőség jellemzői a pontos mintainjektálás biztosítására.

Oszlopos sütő: Az oszlopkemencét az elválasztó oszlop hőmérsékletének szabályozására használják. A hőmérséklet szabályozásával az oszlopban lévő minta eloszlási együtthatója és elválasztási sebessége módosítható, így optimalizálható az elválasztási hatás.

Detektor: A detektor az elválasztott vegyület kimutatására és a koncentrációjához kapcsolódó elektromos jel generálására szolgál. A gyakori detektorok közé tartozik az ultraibolya-látható abszorpciós detektor, a fluoreszcencia detektor és az elektrokémiai detektor. A detektor kiválasztása a vizsgálandó vegyület jellemzőitől és a detektálási érzékenységi követelményektől függ.

Adatgyűjtő rendszer: Az adatgyűjtő rendszer a detektor által kibocsátott jelek fogadására, rögzítésére és elemzésére szolgál. Az észlelt jelet olyan paraméterekké alakíthatja át, mint a csúcsterület és a retenciós idő, valamint elemzést és az eredmények értelmezését biztosítja.

 

Az oldószer eltávolítása utánrotációs elpárologtató, a kapott minta általában tömény vagy szilárd. Ha tovább szeretné elemezni vagy kimutatni a mintában lévő vegyületeket, elemezheti azokat nagy teljesítményű folyadékkromatográfiával (HPLC).

Általános lépések a minták HPLC-vel végzett rotációs bepárlás utáni elemzéséhez

 

1. A minta feloldása: a mintát rotációs bepárlás után megfelelő oldószerben oldjuk fel. Az oldószerek kiválasztásakor figyelembe kell venni a vizsgálandó anyag oldhatóságát és a HPLC elemzési feltételek követelményeit.

2. Standard oldat készítése: Ha kvantitatív analízisre van szükség, a vizsgálandó vegyület standardoldata elkészíthető az elemzési eredmények későbbi korrekciójához és kiszámításához.

3. Végezze el a HPLC elemzést: fecskendezze be a mintát a HPLC rendszerbe és állítsa be a megfelelő elválasztó oszlopot, mozgófázist és detektort. Az elemzés céljának megfelelően válassza ki a megfelelő módszereket és paramétereket, mint pl. áramlási sebesség, hőmérséklet és gradiens program.

4. Adatgyűjtés és elemzés: a minta kromatogramját HPLC rendszerrel gyűjtjük, és a célvegyületet mennyiségileg meghatározzuk vagy azonosítjuk a csúcsterület, a retenciós idő vagy más kapcsolódó paraméterek alapján. A kvantitatív elemzéshez standard görbe módszer és belső standard módszer használható.

5. Eredmények értelmezése: Az elemzési eredmények alapján a mintában lévő vegyületeket minőségileg és mennyiségileg is értékeltük. Igény szerint jelentéseket készíthet vagy elemzési eredményeket rögzíthet.

 

A rotációs bepárlás alkalmazásának a HPLC analízisben két gyakorlati jelentése van

 

• Mintakoncentráció: Bizonyos esetekben az analizálandó minta koncentrációja túl alacsony lehet, ezért a vegyszeres forgóbepárló segítségével a minta koncentrálható, hogy növelje az analit kimutatási érzékenységét HPLC-ben.
• Oldószer eltávolítása: Egyes mintákban az oldószerek megzavarhatják a HPLC analízist, ezért szükséges a mintákban lévő oldószerek eltávolítása vagy helyettesítése HPLC-re alkalmas oldószerekkel. A laboratóriumi rotációs bepárló segíthet az oldószer eltávolításában és a minta HPLC analízisre alkalmas formájává alakításában.

 

HPLC elemzés ésrotációs elpárologtatókét általánosan használt technika a kémiai elemzésben, és elvileg és alkalmazásukban van néhány különbség és összefüggés.

 

Különbség

 

Elv: A HPLC a folyadékkromatográfia elvén alapul, az elválasztás és a kvantitatív elemzés az állófázis (oszlop) és a mozgófázis (oldószer) kölcsönhatásával valósul meg. Az elpárologtató a melegítés és a forgatás elvét használja a folyékony minta gyors elpárologtatására és az oldószer eltávolítására, így koncentrálja a mintát vagy megváltoztatja a minta oldószerkörnyezetét.

Alkalmazási mező: A HPLC-t széles körben használják a kémiában, a gyógyszerészetben, a környezetvédelemben és más területeken, és összetett keverékekben lévő vegyületek szétválasztására, azonosítására és mennyiségi elemzésére használható; A rotációs bepárlást főként a minta koncentrálására, az oldószer eltávolítására és a minta előkészítésére használják, és általában szerves szintézisben, természetes termékek extrakciójában, minta-előkészítésben és más területeken használják.

Elemzési sebesség: A HPLC analízis általában sok időt vesz igénybe a minták elkülönítése és kimutatása, ami néhány perctől több óráig is eltarthat; A vákuum rotációs elpárologtató egység gyorsan, rövid idő alatt képes elpárologtatni a folyékony mintákat, általában csak néhány percet vesz igénybe.

 

Csatlakozás

 

Mintakezelés: A rotációs bepárló berendezést gyakran használják a minták koncentrálására vagy az oldószerek eltávolítására a minta-előkészítés során, hogy a mintákat alkalmassá tegyék további elemzési módszerekre, például HPLC-re. A HPLC analízis hatása és pontossága a minta koncentrálásával és az oldószer forgóbepárlóval történő eltávolításával javítható.

Oldószer kiválasztása: A HPLC analízisben az oldószer megválasztása nagyon fontos az elválasztási hatás szempontjából; Arotációs elpárologtatósegíthet eltávolítani az oldószert a mintából, és a mintát HPLC analízisre alkalmas formává alakítani. Ezért a rotációs bepárló kielégítő oldószerkörülményeket tud biztosítani a HPLC elemzéshez.

 

Kézi emelő rotovapot és elektromos emelő rotovapot biztosítunk, kérjük lépjen kapcsolatba velünksales@achievechem.comtestreszabhatja saját rotációs elpárologtató gépét.