Klasszikus oszlopkromatográfia

Klasszikus oszlopkromatográfia, más néven folyékony-szilárd kromatográfia, az oldott anyag elválasztására szolgáló módszer az álló fázis (általában szilárd adszorbens) és a mobil fázis (oldószer) közötti eloszlás különbségének alapján.. Az alapvető elv a következőképpen foglalható össze: a rögzített fázis segítségével az oldott elemek felhasználásával az oldott anyag felhasználásával az oldott elemek felhasználásával az oldott elemek felhasználásával az oldott elemek felhasználásával az oldott elemek felhasználásával az oldott elemek felhasználásával az oldott elemek felhasználásával az oldott elemek felhasználásával az oldott elemek felhasználásával az elterjedt elosztást használjuk. együtthatók a rögzített fázis és a mobil fázis között .

Az oszlopkromatográfiában az álló fázis általában porózus részecskékből áll (például szilikagél, alumínium -oxid, aktivált szén stb.) Az álló fázisból, és kiválasztását az oldott anyag polaritása és az adszorbens . adszorpciós jellemzőinek megfelelően kell meghatározni.

In the separation process, the mixture solution is introduced into the column containing the stationary phase. With the flow of the mobile phase, the components move down the column at different speeds due to the different adsorption capacity of the stationary phase. The more polar components are usually easy to be adsorbed by the stationary phase, so they move slowly. However, the component with weak polarity Könnyen elviszi a mobil fázissal, és a mozgó sebesség gyorsabb . Ilyen módon, az egyes összetevők számos színes sávot képeznek az oszlopon, hogy elválasztást érjenek el .

► A származékos kezelés célja
A derivatizáció fő célja az analitok fizikai -kémiai tulajdonságainak megváltoztatása úgy, hogy azok jobban alkalmasak legyenek a . oszlopkromatográfiával történő elkülönítéshez és detektáláshoz, a származékos feldolgozás a következő célokat érheti el:

1) Javított észlelési teljesítmény: A könnyen észlelhető funkcionális csoportok bevezetésével az analit erősebb jelet generál az detektoron, javítva a detektálás érzékenységét és pontosságát .
2) Változtassa meg a molekuláris szerkezetet vagy a polaritást: Állítsa be az analit polaritását, hogy javítsa az oszlop elválasztását, és csökkentse a csúcsot, és átfedésben legyen .
3) Megnövekedett volatilitás: Néhány nem egyértelmű analit esetében a származékosodás javíthatja azok volatilitását, megkönnyítve őket a gázkromatográfiában . gázkromatográfiában.
4) Stabil analit: Az analit érzékeny funkcionális csoportjai származékosulással védhetők, hogy megakadályozzák a lebomlást vagy a változást az elválasztás és a detektálás során. .

► A származékos kezelés típusa
A derivatizáció elsősorban két típusra oszlik: az oszlopok előtti származékosítás és az oszlop utáni származékozás:

1) Az oszlop előzetes származtatása:
Mielőtt az analit belépne az oszlopba, kémiailag reagál a származékokkal, hogy a . származékokat előállítsa.
A származékokat ezután elválasztják és észlelik a . oszlopon
A precolumn-derivatizációnak előnyei vannak a szabad reakciókörülmények és az egyszerű többlépcsős reakció előnyeivel, de szennyeződéseket is bevezethetnek, vagy elveszíthetik a mintákat .
2) Oszlopok utáni származtatás:
Az analitokat először a kromatográfiás oszlopon választják el, majd kémiailag reagálnak a származékos sejtben a . származékos származékokkal.
A kapott származékokat ezután beírják a detektorba detektálás céljából .

Az oszlop utáni származtatásnak a jó reprodukálhatóság és a kevésbé befolyásoló tényezők előnyei vannak, de további eszközöket és berendezéseket igényel .
► Alkalmazási példák a származékos feldolgozásra
A természetes gyógyszerészeti kémiai komponensek extrakciója és elválasztása során a származékos feldolgozási technológiával kombinálva elérheti a következő alkalmazásokat:

1) Javított detektálási érzékenység: Például az aminosav-elemzés során a könnyen kimutatható funkcionális csoportok (például a fluoroforok) bevezetése az oszlopok előtti származékosítás révén növelheti az aminosavak jelszilárdságát a detektoron, ezáltal javítva a detektálás érzékenységét .}}}}}}}}}}}}}}
2) Javítsa az elválasztási hatást: Egyes hasonló polaritású vagy hasonló szerkezetű vegyületek esetében a polaritást derivatizációs kezeléssel lehet beállítani, hogy a kromatográfiás oszlop elválasztási hatása javítható . Például a flavonoidok elemzésében, a különféle funkcionális csoportok bevezethetők a származékosító kezelés révén, ezáltal kiigazítva a polaritásukat és javítva az elválasztást.
3) Az érzékeny funkcionális csoportok védelme: Az érzékeny funkcionális csoportokat tartalmazó analitok (például fenolos hidroxil, amino stb. szétválasztás .